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2019-2020年高中生物《微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用》教案1 蘇教版選修1 重點(diǎn)知識(shí)歸納及講解 （一）微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及功能 1、微生物需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水五大類。 2、碳源、氮源、生長(zhǎng)因子的來(lái)源及功能。 （二）培養(yǎng)基的種類及配制原則 （三）無(wú)菌技術(shù) 1、無(wú)菌技術(shù)的內(nèi)容 　　(1)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒。 　　(2)將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。 　　(3)已經(jīng)滅菌處理的材料用具不與周圍的物品接觸。 　　(4)實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。 2、消毒方法 　　(1)煮沸消毒法：如在100℃煮沸5～6min。 　　(2)化學(xué)藥劑消毒法：如用酒精擦拭雙手，用氯氣消毒水源。 3、滅菌方法 　　(1)灼燒滅菌。 　　(2)干熱滅菌。 　　(3)高壓蒸汽滅菌。 （四）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基 1、計(jì)算 　　根據(jù)配方比例，計(jì)算配制一定量的培養(yǎng)基所需各種成分的用量。 2、稱量 3、溶化 4、滅菌 5、倒平板 思考：平板冷凝后，為什么要將平板倒置？ 　　平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。 （五）純化大腸桿菌 1、平板劃線法 　　——通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后，可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體，即菌落。 思考： 　?。?）為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？ 　　操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端，從而通過(guò)劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個(gè)菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 　?。?）在作第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？ 　　劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。 2、稀釋涂布平板法 　　——是將菌液進(jìn)行一序列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。 課外拓展 細(xì)菌的芽孢 　　為數(shù)不多的產(chǎn)芽孢細(xì)菌生長(zhǎng)到后期，在其菌體內(nèi)形成的厚壁、折光性強(qiáng)、具抗逆性的孢子——芽孢。每個(gè)細(xì)菌一般只產(chǎn)生一個(gè)芽孢，所以芽孢不是細(xì)菌的繁殖型，絕大多數(shù)產(chǎn)芽孢細(xì)菌為革蘭氏陽(yáng)性桿菌，其中主要為好氧的芽孢桿菌屬和厭氧的梭菌屬。放線菌中的高溫放線菌屬（Thermoactinomyces）也能產(chǎn)芽孢。 　　芽孢是代謝活性很低，對(duì)干燥、熱、化學(xué)藥物（酸類）和輻射等具有高度抗性的休眠體。例如，在很難覓到生物的沙漠中就有大量枯草桿菌和巨大芽孢桿菌的芽孢。 　　芽孢的抗逆性和休眠能力有助于產(chǎn)芽孢細(xì)菌渡過(guò)困境，故芽孢對(duì)產(chǎn)芽孢細(xì)菌的生存具有重要意義。 　　了解芽孢還有重要的實(shí)踐意義： 　?、傺挎呤羌?xì)菌分類鑒定中一項(xiàng)重要的形態(tài)特征； 　?、跉缪挎呤侵朴啘缇鷺?biāo)準(zhǔn)的主要依據(jù)：主要是以殺滅肉毒梭菌、破傷風(fēng)梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌和嗜熱脂肪芽孢桿菌等強(qiáng)致病性病菌或高耐熱性細(xì)菌的芽孢為標(biāo)準(zhǔn)的； 　　③許多產(chǎn)芽孢細(xì)菌是強(qiáng)致病菌：例如，炭疽芽孢桿菌、肉毒梭菌和破傷風(fēng)梭菌等； 　　④有些產(chǎn)芽孢細(xì)菌可伴隨產(chǎn)生有用的產(chǎn)物，如抗生素短桿菌肽（gramicidin）、桿菌肽（bacitracin）等。 　　芽孢形成：產(chǎn)芽孢細(xì)菌通常在必需的養(yǎng)料（碳源 /或氮源）耗盡而停止生長(zhǎng)（即過(guò)了對(duì)數(shù)期轉(zhuǎn)入穩(wěn)定期）形成芽孢。各種細(xì)菌有其形成芽孢的最適條件，包括pH、供氧情況、溫度、營(yíng)養(yǎng)、培養(yǎng)基中的離子濃度和種類等。