微生物學(xué)沙門(mén)菌弧菌PPT課件
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第三節(jié) 沙門(mén)菌屬 (Salmonella),1.種類(lèi)繁多(血清型超過(guò)2500個(gè))2.宿主范圍廣,多對(duì)動(dòng)物致病3.只對(duì)人類(lèi)致病的占少數(shù) 傷寒沙門(mén)菌 甲型副傷寒沙門(mén)菌 肖氏傷寒沙門(mén)菌 希氏傷寒沙門(mén)菌4. 動(dòng)物沙門(mén)菌也可對(duì)人致病 鼠傷寒沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌 、腸炎沙門(mén)菌、鴨沙門(mén)菌,1,一、 生物學(xué)性狀,形 態(tài) 染 色,2,1.未接種細(xì)菌,3.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣、硫化氫陰性,2.分解乳糖和葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫陰性,4.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫,5.不分解乳糖、分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣、硫化氫,主要生化特性,3,4,5,主要沙門(mén)菌的生化特性,6,抗原結(jié)構(gòu)(O抗原、H抗原、Vi抗原)1、沙門(mén)菌“O”抗原--- 耐熱菌體抗原用阿拉伯?dāng)?shù)字 1、2、3、…表示(從1~67),實(shí)際上共有58種。不同沙門(mén)菌可有相同的O抗原,故將有共同O抗原沙門(mén)菌歸一群(組),共可分40多組。引起人類(lèi)疾病的沙門(mén)菌,其O抗原大多屬于A(yíng)~E組(P126 表10-5)。,,7,2、沙門(mén)菌“H”抗原--- 不耐熱鞭毛抗原H抗原分為第 1 相、第 2 相第 1 相特異性高,以英文小寫(xiě)字母表示第 2 相特異性較低,以阿拉伯?dāng)?shù)字表示各組沙門(mén)菌可依H抗原不同分種、型,H 抗原為特異性抗原?;瘜W(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)。,,8,3、沙門(mén)菌“Vi”抗原--- 表面抗原少數(shù)沙門(mén)菌(傷寒桿菌等)新從病人體內(nèi)分離標(biāo)本常有表面抗原Vi---virulence 毒力Vi抗原可阻斷O抗原與相應(yīng)抗體的凝集,在細(xì)菌鑒定中應(yīng)予注意。Vi抗原可刺激機(jī)體產(chǎn)生低效價(jià)抗體,隨細(xì)菌清除,此抗體消失,故測(cè)定Vi抗體有利于檢出帶菌者。,9,二、致病性,1、侵襲力沙門(mén)菌有毒株經(jīng)口感染 小腸末端派伊爾淋巴結(jié)M細(xì)胞 被吞噬 在吞噬細(xì)胞內(nèi)增殖(不完全吞噬),,,,致病物質(zhì),10,2、內(nèi)毒素 導(dǎo)致體溫升高、白細(xì)胞數(shù)變化等,,3、腸毒素 個(gè)別沙門(mén)菌可產(chǎn)生腸毒素(鼠傷寒),作用 與大腸桿菌、霍亂弧菌腸毒素相似,引起胃腸炎,,,致病物質(zhì),11,致病菌 傷寒沙門(mén)菌,副傷寒甲、乙等沙門(mén) 傳染源 病人、帶菌者(尤為重要) 傳播途徑 經(jīng)糞-口途徑傳播 易感者 人群普遍易感,所致疾病,1、腸熱癥(傷寒、副傷寒),,12,血流(第?次菌血癥、內(nèi)毒素),全身淋巴組織中大量增殖 (肝、脾、腎、骨髓),傷寒沙門(mén)菌,,,腸粘膜局部淋巴組織中增殖,局部炎癥、癥狀,加重局部炎癥 潰瘍、穿孔,,,全身癥狀(發(fā)熱、不適、全身疼痛) 潛伏期/前驅(qū)期(病程第1周),全身癥狀(稽留高熱 肝脾腫大等) 極期(病程第2-3周),13,整個(gè)病期約一個(gè)月左右,少數(shù)患者病后帶菌(腸道內(nèi)、膽囊?guī)Ь┏蔀橹匾膫魅驹?感染后體內(nèi)有抗體產(chǎn)生,但對(duì)胞內(nèi)菌無(wú)免疫作用,常用抗體測(cè)定作為傷寒病的輔助診斷——肥達(dá)反應(yīng)。,細(xì)胞免疫逐漸增強(qiáng) 細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌被清除,逐步痊愈,病后免疫以細(xì)胞免疫為主,終身免疫,,14,因攝入大量(108)其它沙門(mén)菌污染食物后引起 潛伏期 6-12小時(shí) 主要表現(xiàn) 惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、發(fā)熱持續(xù)3-5天,2、胃腸炎(食物中毒),15,3、敗血癥,多見(jiàn)小兒及免疫功能低下者 病原菌為其它沙門(mén)菌(豬霍亂、鼠傷寒等) 可致全身感染,敗血癥、腦膜炎、骨髓炎、心內(nèi)膜炎等。局部胃腸炎少見(jiàn)。,4、無(wú)癥狀帶菌者,多見(jiàn)傷寒、副傷寒患者 帶菌部位 膽囊 與年齡性別關(guān)系密切,16,三、微生物學(xué)檢查,傷寒病人按病程不同取不同標(biāo)本,第一周,第二周起,病程全程,食物中毒者取排泄物、嘔吐物、可疑食物,敗血癥患者取血液,細(xì)菌的分離鑒定,標(biāo)本,血,尿、糞便,骨髓,17,細(xì)菌分離鑒定步驟,糞便、尿,增菌培養(yǎng),SS 中國(guó)蘭,挑取不發(fā)酵 乳糖菌落,,,,,血清學(xué)鑒定:直接玻片凝集,傷寒桿菌表現(xiàn)葡萄糖 +乳糖 —?jiǎng)恿? +H2S +/—,雙糖管,,18,19,用已知的傷寒桿菌“O” 、“H”抗原及副傷寒甲、乙的“H”抗原與不同稀釋度的病人血清作試管凝集試驗(yàn)。根據(jù)血清中抗體效價(jià)及動(dòng)態(tài)變化,可作為傷寒、副傷寒病人的輔助診斷試驗(yàn)。,血清學(xué)試驗(yàn) —— 肥達(dá)反應(yīng)(Widal test),概念,20,1、正常效價(jià) O抗體≤ 1:80 H抗體≤ 1:160PA抗體≤ 1:80 PB抗體≤ 1:80 2、病程中動(dòng)態(tài)觀(guān)察二份血清,第二次效價(jià)增長(zhǎng)四倍以上有意義 3、O、H抗體的區(qū)別O-Ab-IgM (特點(diǎn))H-Ab-IgG (特點(diǎn)),分析肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果,21,▲ O、H均不增高——傷寒、副傷寒可能性小▲ O增高、H不增高——感染早期、其它沙門(mén) 菌感染▲O不增高、H增高——預(yù)防接種后、非特異性回憶 反應(yīng) ▲ O、H均增高——傷寒、副傷寒可能性大4、抗體始終不升高的可能因素早期使用抗生素、免疫功能低下等,22,例:發(fā)熱兩周后入院,肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果如下,甲:O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:40,乙 O 1:80 H 1:320 PA 1:40 PB 1:40,丙 O 1:160 H 1:80 PA 1:40 PB 1:320,丁 O 1:320 H 1:640 PA 1:40 PB 1:40,23,傷寒病人微生物檢查陽(yáng)性率,系列1-尿液中細(xì)菌培養(yǎng);系列2-血液中細(xì)菌培養(yǎng); 系列3-糞便中細(xì)菌培養(yǎng);系列4-肥達(dá)反應(yīng)抗體效價(jià),陽(yáng) 性 率,病程:發(fā) 病 后 周 次,24,細(xì)菌培養(yǎng)(按前面步驟進(jìn)行) Vi抗體效價(jià)測(cè)定 Vi抗體 ≥ 1:10 有意義。,四、防治原則(了解),▲ 預(yù)防接種:死菌苗、活菌苗(Ty21a株),▲ 徹底治療病人及帶菌者,▲ 注意飲食衛(wèi)生,防止病從口入,傷寒帶菌者檢查,25,變形桿菌屬(簡(jiǎn)述 P181 ),變形桿菌屬腸桿菌科 有周身鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑,培養(yǎng)基中遷徙生長(zhǎng) 能分解尿素(重要特征) 主要引起各種創(chuàng)傷感染、尿路感染等,變形桿菌的遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象,,26,變形桿菌的遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象,27,變形桿菌某些菌株的菌體抗原,與部分立克次體間有共同抗原成分。因此可用變形桿菌作為抗原與立克次體感染者血清做交叉凝集反應(yīng),稱(chēng)外裴試驗(yàn)(Weil-Felix test)——輔助診斷斑疹傷寒等疾病,外裴試驗(yàn),28,第11章 弧菌屬 (Vibrio),為一大群菌體彎曲呈弧狀的革蘭陰性菌主要特點(diǎn):有單鞭毛,運(yùn)動(dòng)活潑培養(yǎng)要求為堿性環(huán)境自然界廣泛分布, 尤其是水體中,致病菌主要有霍亂弧菌、副溶血性弧菌。 與腸桿菌科不同的是氧化酶試驗(yàn)陽(yáng)性。,29,※自1817年已發(fā)生過(guò)7次世界性霍亂大流行,前6次由霍亂弧菌古典生物型引起,第7次由霍亂弧菌El Tor生物型引起。 ※霍亂弧菌古典生物型的發(fā)現(xiàn)與命名——1854年首次發(fā)現(xiàn),1884年分離成功-Koch,,第一節(jié) 霍亂弧菌霍亂弧菌病原菌的發(fā)現(xiàn)與命名,30,※ EI Tor 弧菌的發(fā)現(xiàn)與命名——1905年在埃及EI Tor檢疫所檢出,當(dāng)時(shí)未發(fā)現(xiàn)與霍亂發(fā)病有關(guān)系。1961年確定為霍亂病原菌,命名為EI Tor 型霍亂弧菌※ 1992年出現(xiàn)新流行菌株O139,是目前在東南亞各國(guó)流行的主要病原菌,這是首次由非O1群霍亂弧菌引起的流行,霍亂弧菌病原菌的發(fā)現(xiàn)與命名,31,一、生物學(xué)性狀,■ 形態(tài)與染色G— 弧形,有單鞭毛,運(yùn)動(dòng)十分活潑。,霍亂弧菌 掃描電鏡 ×15000,,32,33,※營(yíng)養(yǎng)要求不高,普通培養(yǎng)基上 生長(zhǎng)良好。 ※ 耐堿怕酸— pH8.8~9.0 堿性蛋白胨水/堿性瓊脂平板。 ※霍亂弧菌可在無(wú)鹽的環(huán)境中生長(zhǎng),其他弧菌不能。,,■ 培養(yǎng)特性,34,35,※霍亂弧菌具有 O 抗原、H 抗原 ※ O 抗原 目前發(fā)現(xiàn)的已有155個(gè)血清群,O1、O139群引起霍亂,其他血清群引起人類(lèi)胃腸炎等疾病。 ※ O1群又可分為3個(gè)血清型。,■ 抗原構(gòu)造與分型,36,霍亂弧菌O1群血清型,37,■ 抗原構(gòu)造與分型,※根據(jù)表型差異,O1群霍亂弧菌的每一個(gè)血清型還可分為2個(gè)生物型。,38,39,40,,● 1992年在印度、盂加拉國(guó)暴發(fā)O139 群霍亂流行。O139 群在抗原性方面與O1 群無(wú)交叉。WHO規(guī)定, 霍亂的病原體包括O1群和O139 群霍亂弧菌,● O-1群 有3個(gè)血清型, 每一血清型均含有 二種生物型,古典生物型、 EI Tor 生物型, 二種生物型均可引起霍亂流行,41,■ 抵抗力,對(duì)酸、含氯的化學(xué) 消毒劑敏感 正常胃酸4 min 漂白粉:水= 1:4 ,1h,42,二、致病性,致病物質(zhì) 1、侵襲力鞭毛---穿透能力強(qiáng),穿過(guò)腸道粘液層,有利于細(xì)菌粘附于腸壁上皮細(xì)胞。菌毛---定居因子,是細(xì)菌定居于小腸粘膜上皮細(xì)胞的重要因素。2、霍亂腸毒素,,43,44,45,霍亂腸毒素化學(xué)結(jié)構(gòu)與致病機(jī)理,,性質(zhì) 外毒素,是腸毒素的典型代表,結(jié)構(gòu) A+B亞單位構(gòu)成,A是毒性部分,B是運(yùn)載和保護(hù)部分,致病機(jī)理 B與腸粘膜上皮細(xì)胞受體(GM1) 結(jié)合,形成穿膜孔道 A進(jìn)入細(xì)胞內(nèi), 作用于細(xì)胞內(nèi)腺苷環(huán)化酶 細(xì)胞內(nèi) cAMP 分泌增多再吸收 劇烈吐泄,,,,,46,47,2、所致疾病------霍亂 傳染源 病人,帶菌者 傳播途徑 經(jīng)口傳播 人類(lèi)為唯一易感者霍亂弧菌對(duì)酸敏感,正常胃酸可殺死細(xì)菌。 霍亂弧菌腸毒素作用后,引起劇烈腹瀉、嘔吐,典型病例大便為米泔水樣。病人可嚴(yán)重脫水、酸中毒;最終因循環(huán)衰竭,死亡。 未經(jīng)治療者死亡率高達(dá)50%~75%,48,3、免疫性,牢固的終身免疫 以體液免疫為主,出現(xiàn)保護(hù)性抗腸毒素抗體、抗菌抗體。 O139與O1 之間無(wú)交叉免疫:O抗原基因由rfb區(qū)域編碼,O139弧菌O抗原基因大部分缺失,使O-1菌苗對(duì)O139弧菌不起作用。,49,三、微生物學(xué)檢查,霍亂為烈性傳染病,傳播速度極快。 對(duì)首例病例要及時(shí)診斷,封鎖疫區(qū),上報(bào)疫情。 一般根據(jù)病情診斷,必要時(shí)將可疑物密封保存于堿性蛋白胨水,送上級(jí)檢疫部門(mén)。,直接鏡檢-動(dòng)力、染色,,分離培養(yǎng)-堿性培養(yǎng)基,快速診斷-免疫熒光,血清學(xué)鑒定,,檢查步驟,,,,50,51,*O1群霍亂弧菌死菌苗肌肉注射 *目前疫苗的研制轉(zhuǎn)向口服疫苗、基因 工程減毒活疫苗 *治療:補(bǔ)液、抗菌,防治原則,52,嘉興市秀城區(qū)某餐廳因承辦婚宴發(fā)生一起食物中毒事件。2004年4月28日中午12時(shí)左右,婚宴10桌,100人就餐。從當(dāng)日17時(shí)起,就餐人群開(kāi)始出現(xiàn)病人,至次日11時(shí),中毒病人31人,罹患率為31%。癥狀主要為腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等胃腸道癥狀。副溶血性弧菌廣泛生存近岸海水和魚(yú)貝類(lèi)等食物中,溫、熱地帶較多。我國(guó)華東沿海該菌的檢出率為57.4~66.5%,尤以夏秋季較高。海產(chǎn)魚(yú)蝦的帶菌率平均為45~48%,夏季可高達(dá)90%。腌制的魚(yú)貝類(lèi)帶菌率也可達(dá)42.4%。,53,第五節(jié) 副溶血弧菌(了解),副溶血弧菌(原名-嗜鹽弧菌) 主要引起疾病----食物中毒 特點(diǎn): 細(xì)菌嗜鹽,易污染海產(chǎn)品,在海水中可存活50天。 培養(yǎng)要求3.5% 氯化鈉 潛伏期短,幾小時(shí)即可發(fā)病。癥狀嚴(yán)重,可有水樣、血水樣便?;謴?fù)較快。,54,TCBS培養(yǎng)基:顯示綠色菌落,非蔗糖發(fā)酵,55,,第12章 幽門(mén)螺桿菌(HP),,G-桿菌,弧形、S形或螺旋狀 營(yíng)養(yǎng)要求高,生長(zhǎng)緩慢 尿素酶試驗(yàn)強(qiáng)陽(yáng)性 抵抗力弱,易產(chǎn)生耐藥性,生物學(xué)性狀,Helicobacter pylori,是螺桿菌屬的代表菌種,56,,,致病性,,感染普遍,糞-口傳播 與胃炎、十二指腸潰瘍及胃癌有關(guān) (1983年,澳大利亞皇家醫(yī)院內(nèi)科醫(yī)生馬歇爾、沃倫,2005年醫(yī)學(xué)諾貝爾獎(jiǎng)獲得者) 致病物質(zhì)及致病機(jī)制不詳,幽門(mén)螺桿菌,57,幽門(mén)螺桿菌,,微生物學(xué)檢查,,有創(chuàng)檢查 ①直接涂片②脲酶試驗(yàn)③分離培養(yǎng) 無(wú)創(chuàng)檢查 ①碳標(biāo)記呼吸試驗(yàn)②血清學(xué)試驗(yàn),傳統(tǒng)方法,新法 PCR、核酸探針技術(shù),治療 抗生素(聯(lián)用),痢特靈(呋喃唑酮),58,Salmonella 沙門(mén)菌屬 Widal test 肥達(dá)反應(yīng) Vibrio 弧菌屬 V.cholera 霍亂弧菌 non-agglutinating Vibrio, NAG 不凝集弧菌,本章專(zhuān)業(yè)英語(yǔ)詞匯,59,了解主要沙門(mén)菌的生化反應(yīng)。 傷寒沙門(mén)菌的主要致病因素及傷寒發(fā)病過(guò)程。 何謂肥達(dá)反應(yīng)?如何觀(guān)察分析肥達(dá)反應(yīng)結(jié)果? 弧菌屬的O抗原分型及與霍亂發(fā)病的關(guān)系。 霍亂弧菌的致病因素。 霍亂腸毒素的致病機(jī)理。,本 章 要 點(diǎn),60,- 1.請(qǐng)仔細(xì)閱讀文檔,確保文檔完整性,對(duì)于不預(yù)覽、不比對(duì)內(nèi)容而直接下載帶來(lái)的問(wèn)題本站不予受理。
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