啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)（打包6套）新人教版.zip,啟東市,高中生物,專題,DNA,蛋白質(zhì),技術(shù),課題,多聚酶,鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增,片段,練習(xí),打包,新人 實驗——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段 1． 下列有關(guān)PCR技術(shù)的說法，錯誤的是： A．DNA復(fù)制所需要的引物的作用是使DNA聚合酶能從3’端延伸DNA鏈 B．引物與DNA母鏈的關(guān)系是堿基互補(bǔ)配對 C．添加緩沖溶液的作用是維持pH基本不變 D．DNA聚合酶可以用來合成引物 2． 在實驗室內(nèi)模擬生物體內(nèi)的DNA復(fù)制，需要哪些條件（　?。? ①酶　②游離的脫氧核苷酸?、跘TP　④DNA分子?、菀铩、辴RNA　⑦適宜的溫度?、噙m宜的酸堿度 A．①②③④⑤⑥ B．②③④⑤⑥⑦ C．②③④⑤⑦⑧ D．①②④⑤⑦⑧ 3． 在PCR的實驗操作中，下列說法正確的是（　　） ①在微量離心管中添加各種試劑時，只需要一個槍頭 ②離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán) ③用手指輕彈離心管壁 ④離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部 A．①②③ B．①②④ C．②③④ D．①③④ 4． 在PCR實驗操作中，下列說法不正確的是（　　） A．在微量離心管中添加各種試劑時，只需一個槍頭 B．離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)，防止液體外溢 C．用手輕彈離心管壁的目的是使反應(yīng)液充分混合 D．離心的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部，提高反應(yīng)效果 5． PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA，需要的條件是（　?。? ①目的基因?、谝铩、鬯姆N脫氧核苷酸?、蹹NA聚合酶等?、輒RNA?、藓颂求w A．②③④⑤ B．①②③⑥ C．①②③④ D．①③④⑤ 6． 下列對操作過程的敘述，錯誤的是（　　） A．PCR反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌 B．PCR所用的緩沖液和酶應(yīng)分裝成小份，并在－20 ℃儲存 C．PCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后，迅速融化 D．在微量離心管中添加反應(yīng)成分時，每吸取一種試劑后，移液器上的吸液槍頭都必須更換 7． PCR技術(shù)是在遺傳實驗室中常見的一種DNA片段進(jìn)行體外擴(kuò)增的方法，利用它能快速得到大量的目的基因或DNA分子片段。在PCR實驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是（　　） A．反復(fù)洗滌 B．不被外源DNA污染 C．高壓滅菌 D．在－20℃保存 8． 回答下列關(guān)于DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的相關(guān)問題： (1)PCR與生物體內(nèi)的DNA復(fù)制有何區(qū)別？ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)PCR每次循環(huán)都可分為________、________和______三步。 (3)_____ ___的發(fā)現(xiàn)和使用大大提高了PCR的效率，使PCR技術(shù)趨向________。 (4)PCR通過控制________來控制雙鏈的________與________。 (5)PCR反應(yīng)需要一定的緩沖溶液中提供________、分別與兩條模板結(jié)合的__________、__________種脫氧核苷酸、________的DNA聚合酶。 (6)從第二輪循環(huán)開始，DNA聚合酶只能特異的復(fù)制________的DNA序列，使這段________的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。 9． 使用PCR儀具體實驗操作順序應(yīng)為（　　） ①設(shè)計好PCR儀的循環(huán)程序?、诎磁浞綔?zhǔn)備好各組分?、塾梦⒘恳埔浩髟谖⒘侩x心管中依次加入各組分?、苓M(jìn)行PCR反應(yīng)?、蓦x心使反應(yīng)液集中在離心管底部 A．②③⑤④① B．①⑤③②④ C．②③⑤①④ D．④②⑤③① 10． PCR實驗中使用的微量離心管、吸頭、緩沖液以及蒸餾水使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是(　　) A．反復(fù)洗滌 B．外源DNA污染 C．高壓蒸汽滅菌 D．在－20 ℃儲存 參考答案： 1． 答案： D 解析： ? 2． 答案： D 解析： 在實驗室內(nèi)模擬DNA復(fù)制時，需要DNA聚合酶催化合成DNA子鏈；四種脫氧核苷酸為合成子鏈的原料；DNA母鏈為DNA復(fù)制的模板；還需要引物、較高的溫度、適宜的酸堿度等。 3． 答案： C 解析： 在微量離心管中添加反應(yīng)成分時，每吸取一種試劑后，移液器上的槍頭都必須更換，以確保實驗的準(zhǔn)確性；蓋嚴(yán)離心管口的蓋子，防止實驗中外源DNA污染；用手指輕輕彈擊管的側(cè)壁，使反應(yīng)液混合均勻；離心目的是使反應(yīng)液集中在離心管的底部，提高反應(yīng)效果。 4． 答案： A 解析： 在微量離心管中添加各種試劑時，每吸取一種試劑后，移液器上的槍頭必須更換，確保實驗的準(zhǔn)確性；離心管的蓋子一定要蓋嚴(yán)，防止實驗中脫落或液體外溢；離心10 s的目的是使反應(yīng)液集中在離心管底部，提高反應(yīng)效果。 5． 答案： C 解析： PCR技術(shù)需要目的基因作為擴(kuò)增的模板，DNA聚合酶催化反應(yīng)的進(jìn)行，而引物是滿足DNA聚合酶起作用的需要，四種脫氧核苷酸是該過程的原料。 6． 答案： C 解析： 為了防止外源DNA等因素的污染，PCR反應(yīng)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌；所用的緩沖液及酶應(yīng)分裝成小份保存，并使用一次性吸液槍頭，即A、B、D均正確。在冰箱中放置的緩沖液和酶取出后應(yīng)放在冰塊上緩慢融化，而不能迅速融化，故C錯誤。 7． 答案： C 解析： 通過對PCR實驗中所用儀器和試劑進(jìn)行高壓滅菌，可以避免外源DNA等因素的污染。 8． 答案： (1)①PCR反應(yīng)不需要解旋酶，而生物體內(nèi)DNA復(fù)制時需要解旋酶； ②PCR需要耐熱的DNA聚合酶，而生物體內(nèi)DNA聚合酶在高溫的時候會變性； ③PCR一般要經(jīng)歷三十多次循環(huán)，而生物體內(nèi)DNA復(fù)制需要生物體自身的控制 (2)變性　退火　延伸 (3)Taq聚合酶　自動化 (4)溫度　解聚　結(jié)合 (5)DNA模板　兩種引物　四　耐熱 (6)處于兩個引物之間　固定長度 解析： 本題主要考查關(guān)于DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的知識，尤其對PCR技術(shù)的考查較細(xì)致，可參考。 9． 答案： C 解析： PCR反應(yīng)的操作步驟一般分為準(zhǔn)備(包括配置配方及將各配方放于實驗臺上)→移液→混合→離心→反應(yīng)，因PCR儀是一種自動控制溫度的儀器，設(shè)計好循環(huán)程序就可以進(jìn)行反應(yīng)了。 10． 答案： C. 解析： 通過對PCR實驗中所用儀器和試劑進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，可以避免外源DNA等因素的污染. 4