啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)（打包6套）新人教版.zip,啟東市,高中生物,專題,DNA,蛋白質(zhì),技術(shù),課題,多聚酶,鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增,片段,練習(xí),打包,新人 基礎(chǔ)知識(shí)：PCR的反應(yīng)過(guò)程 1． 下列對(duì)PCR過(guò)程中“溫度的控制”的敘述中不正確的是（　?。?A．PCR反應(yīng)需要高溫，是為了確保模板是單鏈 B．延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度，而小于變性溫度 C．要用耐高溫的DNA聚合酶 D．需要耐高溫的解旋酶 2． 洗滌紅細(xì)胞時(shí)，離心所采用的方法是(　　) A．低速長(zhǎng)時(shí)間離心 B．低速短時(shí)間離心 C．高速長(zhǎng)時(shí)間離心 D．高速短時(shí)間離心 3． 下列各項(xiàng)中，一般不影響凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)中的分離度的是(　　) A．層析柱高 B．層析柱的直徑 C．緩沖溶液 D．樣品的分布 4． 聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過(guò)程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán):95 ℃下使模板DNA變性、解鏈→55 ℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→72 ℃下引物鏈延伸(形成新的脫氧核苷酸鏈)。下列有關(guān)PCR過(guò)程的敘述中不正確的是(　　) A．變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn) B．復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠互補(bǔ)配對(duì)原則完成 C．延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸 D．PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,所需要酶的最適溫度較高 5． 下列關(guān)于PCR技術(shù)的描述，錯(cuò)誤的是（ ） A．以DNA復(fù)制為基礎(chǔ)而建立起來(lái)的技術(shù) B．利用PCR技術(shù)可完全無(wú)誤的擴(kuò)增基因 C．反應(yīng)體系需要模板、引物、四種脫氧核苷酸、耐熱DNA聚合酶和緩沖溶液 D．以變性、復(fù)性和延伸為一個(gè)周期 6． DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)的溫度范圍是（　?。?。 A．10～20 ℃ B．80～100 ℃ C．20～30 ℃ D．40～60 ℃ 7． 在PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)中，加入一種提取物(一種模板DNA片段)，但實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物中，卻有兩種DNA。其原因可能是(　　) A．基因突變 B．Taq聚合酶發(fā)生變異 C．基因污染 D．溫度過(guò)高 8． PCR儀實(shí)質(zhì)上是一臺(tái)自動(dòng)調(diào)控溫度的儀器，下列關(guān)于它調(diào)控不同溫度的目的敘述錯(cuò)誤的是(　　) A．94 °C，使DNA分子變性，解開(kāi)螺旋 B．55 °C，引物與作為模板的單鏈DNA特定部位相互配對(duì)、結(jié)合 C．72 °C，使DNA分子開(kāi)始復(fù)制，延伸 D．72 °C，使DNA分子恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)，恢復(fù)活性 9． PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)，其基本原理和過(guò)程與細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制類似．下列關(guān)于兩者共同點(diǎn)的敘述，不正確的是（　?。? ①邊解旋邊復(fù)制 ②遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則 ③需要引物 ④過(guò)程可分為變性、復(fù)性、延伸等步驟． A．①⑦ B．⑦③ C．③④ D．①④ 10． PCR技術(shù)又稱聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，現(xiàn)在已成為分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的一種常規(guī)手段，它可以在體外很短的時(shí)間內(nèi)將DNA大量擴(kuò)增。你認(rèn)為以下符合在體外進(jìn)行PCR反應(yīng)條件的一組是（ ） ① 穩(wěn)定的緩沖液環(huán)境 ② DNA模板 ③ 合成引物 ④ 四種脫氧核苷酸 ⑤ DNA聚合酶 ⑥ DNA解旋酶 ⑦ 限制性核酸內(nèi)切酶 ⑧ 溫控設(shè)備 A．①②③④⑤⑥ B．①②③④⑤⑥⑦⑧ C．③④⑤⑥⑧ D．①②③④⑤⑧ 參考答案： 1． 答案： D 解析： PCR是體外DNA擴(kuò)增技術(shù)，DNA雙鏈的解開(kāi)不需要解旋酶，而是靠高溫使其變性解體。復(fù)性前，在耐高溫的Taq DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA，因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度但小于變性溫度。 2． 答案： 　B 解析： 　洗滌紅細(xì)胞時(shí)，轉(zhuǎn)速要低，時(shí)間要短，否則白細(xì)胞會(huì)與之一起沉淀，達(dá)不到分離目的。 3． 答案： 　B 解析： 　分離度取決于柱高，為分離不同組分，凝膠柱必須有適宜的高度，分離度與柱高相關(guān)。樣品的分布也影響分離度，緩沖溶液的pH影響蛋白質(zhì)所帶的電荷，因此也影響分離度。只有層析柱的直徑一般不會(huì)影響分離度。 4． 答案： C 解析： 變性過(guò)程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對(duì)之間的氫鍵,也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn);復(fù)性過(guò)程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合依靠互補(bǔ)配對(duì)原則完成;延伸過(guò)程中需要DNA聚合酶、ATP、四種脫氧核糖核苷酸;PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比,所需要酶的最適溫度較高 5． 答案： B 解析： 利用PCR技術(shù)也可能會(huì)出現(xiàn)擴(kuò)增的基因出現(xiàn)錯(cuò)誤。故選B 6． 答案： B 解析： 蛋白質(zhì)大多不能忍受60～80 ℃的高溫，而DNA在80 ℃以上才會(huì)變性。 7． 答案： C 解析： 實(shí)驗(yàn)中得到兩種DNA的原因可能是靶細(xì)胞基因污染造成的，所以在實(shí)驗(yàn)中，必須做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡(jiǎn)化操作程序、使用一次性吸頭等，盡量避免基因污染。 8． 答案： D 解析： PCR利用DNA熱變性的原理，當(dāng)溫度上升到94 °C時(shí)，雙鏈DNA解旋為單鏈，A項(xiàng)正確；當(dāng)溫度下降到40～60 °C左右時(shí)，兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則與兩條單鏈DNA結(jié)合，B項(xiàng)正確；當(dāng)溫度上升到72 ℃左右時(shí)，在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，從而實(shí)現(xiàn)DNA延伸，故C正確，D錯(cuò)誤。 9． 答案： C 解析： 解：①PCR反應(yīng)和體內(nèi)DNA復(fù)制都是邊解旋邊復(fù)制，故①正確； ②PCR反應(yīng)和體內(nèi)DNA復(fù)制都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，故②正確； ③PCR反應(yīng)需要引物，但體內(nèi)DNA復(fù)制不需要引物，故③錯(cuò)誤； ④PCR過(guò)程可分為變性、復(fù)性、延伸等步驟，而體內(nèi)DNA復(fù)制沒(méi)有這些步驟，故④錯(cuò)誤． 故選C． 10． 答案： D 解析： 試題分析：在PCR技術(shù)中，需要的條件有模板、引物、脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶，此外還需要適宜的溫度和pH，故D正確。 考點(diǎn)：本題主要考查PCR的過(guò)程，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。 3