啟東市高中生物專題5DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)課題2多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段練習(xí)（打包6套）新人教版.zip,啟東市,高中生物,專題,DNA,蛋白質(zhì),技術(shù),課題,多聚酶,鏈?zhǔn)椒磻?yīng),擴(kuò)增,片段,練習(xí),打包,新人 實(shí)驗(yàn)——多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)擴(kuò)增DNA片段 1． 在進(jìn)行PCR操作時，如果槍頭受到污染，則會影響到 A． 復(fù)制循環(huán)速度 B. DNA分子純度 C. DNA分子大小 D. 酶催化活性 2． 下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述，正確的是（ ） A． PCR技術(shù)建立在對擴(kuò)增的目的基因序列完全已知的基礎(chǔ)上 B． 該技術(shù)需要解旋酶和熱穩(wěn)定的DNA聚合酶 C． 該技術(shù)需要一對特異性的引物，要求一對引物的序列是互補(bǔ)的 D． 該技術(shù)應(yīng)用體內(nèi)DNA雙鏈復(fù)制原理，也需要模板、原料、能量、酶等條件 3． PCR實(shí)驗(yàn)中用到微量離心管、緩沖液和蒸餾水，使用前必須進(jìn)行的關(guān)鍵步驟是（　?。?A．反復(fù)洗滌 B．用酒精擦洗 C．高壓滅菌 D．在－20 ℃保存 4． DNA在波長為多大的時候有一強(qiáng)烈的吸收峰（　?。?A．260nm B．240nm C．280nm D．300nm 5． PCR反應(yīng)的最大特點(diǎn)是具有較大擴(kuò)增能力與極高的靈敏性，但令人頭痛的問題是易污染，極其微量的污染即可造成假陽性的產(chǎn)生。下列防止污染的辦法中不包括的是（　?。?A．將樣品的處理、配制PCR反應(yīng)液、PCR循環(huán)擴(kuò)增及PCR產(chǎn)物的鑒定等步驟分區(qū)或分室進(jìn)行 B．吸樣槍吸樣要慢，吸樣時盡量一次性完成，槍頭小套、小離心管應(yīng)一次性使用，以免交叉污染 C．所有PCR試劑都應(yīng)放置于大瓶分裝，以減少重復(fù)加樣次數(shù)，避免污染機(jī)會 D．PCR試劑、PCR反應(yīng)液應(yīng)與樣品及PCR產(chǎn)物分開保存，不應(yīng)放于同一冰盒或同一冰箱 6． 在PCR擴(kuò)增的實(shí)驗(yàn)中，加入一種提取物(一種模板DNA片段)，但實(shí)驗(yàn)得到的產(chǎn)物卻有2種DNA。其原因可能是(　　) A．基因突變 B．Taq聚合酶發(fā)生變異 C．基因污染 D．溫度過高 7． 關(guān)于PCR技術(shù)的應(yīng)用，錯誤的一項(xiàng)是(　　) A．古生物學(xué)、刑偵破案、DNA序列測定 B．診斷遺傳病、基因克隆、古生物學(xué) C．DNA序列測定、基因克隆、刑偵破案 D．診斷遺傳病、合成核苷酸、DNA序列測定 8． PCR利用了DNA熱變性的原理，PCR儀實(shí)際上是一種能自動調(diào)控溫度的儀器，對PCR過程中“溫度的控制”的說法中錯誤的是(　　) A．酶促反應(yīng)需要高的溫度，是為了確保模板是單鏈 B．延伸的溫度必須大于復(fù)性溫度，而小于變性溫度 C．DNA聚合酶不具熱變性，要用耐高溫的聚合酶 D．DNA解旋酶不具熱變性，為了確保模板是單鏈 9． 關(guān)于DNA的復(fù)制,下列敘述正確的是(　　) A．DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從5′端延伸DNA鏈 B．DNA復(fù)制不需要引物 C．引物與DNA母鏈通過堿基互補(bǔ)配對進(jìn)行結(jié)合 D．DNA的合成方向總是從子鏈的3′端向5′端延伸 10． 多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)歷下述三十多次循環(huán)：95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性（引物與DNA模板鏈結(jié)合）→72℃下引物鏈延伸（形成新的脫氧核苷酸鏈）。下列有關(guān)PCR過程的敘述中不正確的是：( ) A．變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵，也可利用解旋酶實(shí)現(xiàn) B．復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補(bǔ)配對原則完成 C．延伸過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸 D．PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需要酶的最適溫度較高 參考答案： 1． 答案： B 解析： ? 2． 答案： D 解析： ? 3． 答案： C 解析： 在PCR實(shí)驗(yàn)中，為了避免外源DNA等因素的污染，微量離心管、槍頭、緩沖液和蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌。同時也不能忽視其他操作步驟，如緩沖液和酶應(yīng)該分裝成小份，并且在－20 ℃保存。 4． 答案： A 解析： ? 5． 答案： C 解析： 所有的PCR試劑都應(yīng)放置于小瓶分裝，一次性用完，避免因多次使用造成污染。 6． 答案： C 解析： 其原因可能是基因污染。在PCR實(shí)驗(yàn)中，一定要做到隔離操作區(qū)、分裝試劑、簡化操作程序、使用一次性吸頭等，盡量避免基因污染。 7． 答案： D. 解析： PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)上用于遺傳病的基因診斷、基因克隆、DNA序列測定，法醫(yī)上用于刑偵破案，古生物學(xué)上用于生物化石樣品分析.PCR技術(shù)是以4種脫氧核苷酸為原料，合成雙鏈DNA的過程，PCR技術(shù)不能合成核苷酸. 8． 答案： D. 解析： PCR是一種體外DNA擴(kuò)增技術(shù).DNA雙鏈的解開不需要解旋酶，靠高溫使其變性，雙螺旋結(jié)構(gòu)解體，雙鏈分開，延伸時，在耐高溫的DNA聚合酶的作用下根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則合成新的DNA，因此延伸的溫度要大于復(fù)性溫度小于變性溫度. 9． 答案： C 解析： 由于DNA聚合酶不能從頭開始合成DNA,只能從引物的3′端開始延伸;由于DNA分子是反向平行的,子鏈?zhǔn)且罁?jù)堿基互補(bǔ)配對原則,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是從子鏈5′端向3′端延伸。 10． 答案： C 3