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老年癡呆動(dòng)物模型 小組成員 老年癡呆癥簡(jiǎn)介所謂老年癡呆癥 又稱阿爾茨海默 Alzheimer sdisease AD 是發(fā)生在老年期及老年前期的一種原發(fā)性退行性腦病 指的是一種持續(xù)性高級(jí)神經(jīng)功能活動(dòng)障礙 即在沒(méi)有意識(shí)障礙的狀態(tài)下 記憶 思維 分析判斷 視空間辨認(rèn) 情緒等方面的障礙 疾病類型 1 血管性癡呆癥 這類型的癡呆癥多為血管病變所導(dǎo)致2 腦神經(jīng)細(xì)胞退化性的癡呆癥 其特征性病理變化 為大腦皮層萎縮 并伴有 淀粉樣蛋白 amyloid AP 沉積 神經(jīng)原纖維纏結(jié) neurofibrillarytangles NFT 大量記憶性神經(jīng)元數(shù)目減少 以及老年斑 senileplaque SP 的形成 以下介紹老年癡呆小鼠模型 建模目的 建立老年癡呆 AD 小鼠模型 用于AD及其治療藥物的研究 所需材料 NIH小鼠 蛋白定量 雙縮脲法 測(cè)定試劑盒 乙酰膽堿酯酶 AchE 活性測(cè)定試劑盒和超氧化物歧化酶 SOD 活性測(cè)定試劑盒 D2半乳糖 生化試劑 亞硝酸鈉 分析純 建模方法 選用NIH小鼠 腹腔注射D2半乳糖120mg和亞硝酸鈉90mg 每天1次 連續(xù)60d 制備老年癡呆動(dòng)物模型 通過(guò)水迷宮試驗(yàn) 腦組織勻漿蛋白質(zhì)含量 乙酰膽堿酯酶 AchE 和超氧化物歧化酶 SOD 活性的測(cè)定 腦組織病理切片HE染色和剛果紅染色 比較老年癡呆模型小鼠和正常小鼠的差異 建模步驟 1 雌性NIH小鼠40只 20 24g 每組20只 隨機(jī)分為空白對(duì)照組和AD模型組 造模方法為 小鼠每日腹腔注射D2半乳糖120mg kg和亞硝酸鈉90mg kg 連續(xù)60d 空白對(duì)照組腹腔注射等體積生理鹽水 2 水迷宮試驗(yàn) 自動(dòng)記錄水迷宮裝置為80cm 50cm 20cm的茶色有機(jī)玻璃槽 中國(guó)醫(yī)科院藥物所研制 內(nèi)設(shè)起點(diǎn) 終點(diǎn) 臺(tái)階 和多處盲端 水深9cm 水溫24 27 記錄小鼠從起始點(diǎn)放入至找到臺(tái)階的時(shí)間 尋找潛伏期 若超過(guò)120s則以120s計(jì) 給藥完畢后第1天 各組小鼠進(jìn)行訓(xùn)練 使其找到臺(tái)階 第2 4天加長(zhǎng)路程 記錄各組小鼠的尋找潛伏期 3 腦內(nèi)相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定 行為學(xué)試驗(yàn)結(jié)束后 每組取10只小鼠禁食12h 斷頭處死 取全腦 嗅腦除外 置玻璃勻漿器中 加入預(yù)冷生理鹽水制成10 g ml 腦勻漿 3000r min離心10min 取上清液置冰浴中 測(cè)定蛋白含量和AchE SOD活性 按試劑盒說(shuō)明書所述步驟操作 取樣量均為50ml4 病理檢查 各組余下小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉60mg kg麻醉 仰臥固定于手術(shù)臺(tái)上 剪開(kāi)胸腔 暴露心臟 用生理鹽水和4 多聚甲醛進(jìn)行心臟灌注固定 至四肢僵直為止 取全腦和 頰部皮膚組織置4 多聚甲醛溶液中固定24h 石蠟包埋切片 常規(guī)HE染色和剛果紅染色 統(tǒng)計(jì)方法 數(shù)據(jù)以平均值 標(biāo)準(zhǔn)差表示 使用SPSS810統(tǒng)計(jì)軟件處理 用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 預(yù)防措施 1 改善勞動(dòng)環(huán)境2 忌酒和戒煙3 保持精神愉快利于長(zhǎng)壽及精神健康4 飲食調(diào)節(jié) 既要防止高脂食物引起膽固醇升高 又要攝取必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)5 積極用腦 預(yù)防腦力衰退6 避免過(guò)于深沉 消極 唉聲嘆氣 要以開(kāi)朗的心情生活 謝謝再見(jiàn) 祝大家笑口常開(kāi)