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單元質(zhì)檢卷十　生物技術(shù)與工程 (時(shí)間:45分鐘　滿分:100分) 一、選擇題(本題包括12小題,每小題5分,共60分) 1.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述,正確的是(　　) A.通常使用液體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落 B.若培養(yǎng)基需要調(diào)節(jié)pH,應(yīng)該在滅菌后進(jìn)行 C.用顯微鏡直接計(jì)數(shù)固體培養(yǎng)基中微生物數(shù)量 D.倒置平板可防止培養(yǎng)基被滴落的冷凝水污染 2.如圖為實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和純化大腸桿菌過(guò)程中的部分操作步驟,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(　　) A.①步驟使用的培養(yǎng)基已經(jīng)滅菌并調(diào)節(jié)過(guò)pH B.①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行 C.④在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí)需要將平板倒置 D.④操作過(guò)程中,需灼燒接種環(huán)5次 3.利用卷心菜發(fā)酵制作泡菜過(guò)程中,乳酸菌酵母菌細(xì)胞數(shù)量和pH的變化如圖所示。下列敘述不正確的是(　　) A.酵母菌和乳酸菌均有核膜包被的細(xì)胞核 B.發(fā)酵初期乳酸菌建立了明顯的菌種優(yōu)勢(shì) C.前6天pH下降主要由乳酸菌代謝引起 D.發(fā)酵中期酵母菌通過(guò)無(wú)氧呼吸進(jìn)行增殖 4.要檢測(cè)目的基因是否成功地插入了受體DNA中,需要用基因探針,基因探針是指(　　) A.用于檢測(cè)疾病的醫(yī)療器械 B.用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子 C.帶有標(biāo)記的蛋白質(zhì)分子 D.人工合成的免疫球蛋白 5.下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程和基因工程的比較,不合理的是 (　　) A.基因工程原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì),而蛋白質(zhì)工程可以對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,從而制造一種新的蛋白質(zhì) B.蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,蛋白質(zhì)工程最終還是要通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成 C.當(dāng)?shù)玫娇梢栽?70 ℃條件下保存半年的干擾素后,在相關(guān)酶、氨基酸和適宜的溫度、pH條件下,干擾素可以大量自我合成 D.基因工程和蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異都是可遺傳的 6.下圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是(　　　) A.⑤只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就表明植株發(fā)生了可遺傳變異 B.③侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上 C.④的染色體上若含抗蟲(chóng)基因,則⑤就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀 D.②的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA聚合酶參與 7.下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述,錯(cuò)誤的是(　　) A.電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合 B.某種植物甲、乙兩品種體細(xì)胞雜交與甲、乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)目相同 C.小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體 D.去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理 8.實(shí)驗(yàn)人員利用矮牽牛(二倍體,2n=14)的紅色花瓣細(xì)胞(液泡呈紅色)與枸杞(四倍體,4n=48)葉肉細(xì)胞,制備了相應(yīng)的原生質(zhì)體,并誘導(dǎo)其融合,經(jīng)篩選、培養(yǎng)獲得雜種植株。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.獲得該雜種植株時(shí)不用考慮兩種高等植物間的生殖隔離問(wèn)題 B.可利用聚乙二醇、離心等方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合 C.可利用光學(xué)顯微鏡觀察,篩選出雜種原生質(zhì)體 D.若原生質(zhì)體均為兩兩融合,則融合后的細(xì)胞中染色體數(shù)目均為62條 9.將特定藥物與單克隆抗體相結(jié)合制成的“生物導(dǎo)彈”,能夠用于殺死人類(lèi)某些癌細(xì)胞,其過(guò)程如圖所示。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　) A.用以治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”就是以單克隆抗體作抗癌藥物定向殺死癌細(xì)胞 B.①過(guò)程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同 C.②過(guò)程需要篩選出既能無(wú)限增殖又能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞并克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞 D.過(guò)程③中由于抗體具有高度特異性使其跟蹤作用非常準(zhǔn)確 10.下列關(guān)于生殖細(xì)胞的發(fā)生和受精過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是 (　　) A.卵子是從動(dòng)物的初情期開(kāi)始,經(jīng)過(guò)減數(shù)分裂形成的 B.雄原核形成的同時(shí),卵子完成減數(shù)第二次分裂 C.透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障 D.獲能的精子能夠刺激卵細(xì)胞膜發(fā)生變化,阻止其他精子進(jìn)入卵內(nèi) 11.軟骨發(fā)育不全為常染色體顯性遺傳病,基因型為HH 的個(gè)體早期死亡。一對(duì)夫妻均為該病患者,希望通過(guò)胚胎工程技術(shù)輔助生育一個(gè)健康的孩子。下列做法正確的是 (　　) A.將一個(gè)囊胚進(jìn)行多等分,從中篩選所需胚胎,培養(yǎng)至原腸胚期后移植到子宮 B.從桑椹胚中分離少量滋養(yǎng)層細(xì)胞,培養(yǎng)后檢測(cè)基因型 C.從羊水中提取細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),并根據(jù)檢測(cè)結(jié)果淘汰基因型為hh的胚胎 D.經(jīng)超數(shù)排卵處理后進(jìn)行體外受精 12.生物工程是一門(mén)生物科學(xué)與工程技術(shù)有機(jī)結(jié)合而興起的一門(mén)綜合性的科學(xué)技術(shù),近些年來(lái)發(fā)展迅猛,碩果累累。下列關(guān)于生物工程的說(shuō)法,不正確的是(　　) A.植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理是一樣的,植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的原理是不同的 B.從理論上講,基因工程和細(xì)胞工程都可以定向改造生物的遺傳性狀和克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙 C.基因工程的工具酶有限制酶、DNA 連接酶等,細(xì)胞工程的工具酶有纖維素酶、胰蛋白酶等 D.通過(guò)基因工程和發(fā)酵工程可以生產(chǎn)出乙肝疫苗、胰島素、某些種類(lèi)的單克隆抗體 二、非選擇題(本題包括3小題,共40分) 13.(13分)(2018四川達(dá)州診斷)為調(diào)查某地土質(zhì)狀況,科研小組對(duì)該地土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了分離和純化培養(yǎng)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)分解尿素的細(xì)菌能分解尿素,而其他微生物不能,其根本原因是前者具有　　　　　　　　　　　。為篩選出分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇　　　　作為唯一氮源。分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,但可用葡萄糖作為碳源,由此推測(cè)分解尿素的細(xì)菌是　　　　(填“自養(yǎng)”或“異養(yǎng)”)型生物。 (2)該研究小組將10 g土樣進(jìn)行梯度稀釋,在某個(gè)稀釋度下涂布接種了3個(gè)平板(接種量均為0.1 mL),經(jīng)適宜培養(yǎng)后,3個(gè)平板均沒(méi)出現(xiàn)菌落,分析可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。分析原因后,科研小組用先前制作的未使用的平板重新涂布接種完成實(shí)驗(yàn),在另外某個(gè)稀釋度下涂布接種的3個(gè)平板,經(jīng)適宜培養(yǎng)后均存在多種不同特征的菌落,推測(cè)最可能的原因是　　　　　　　。 (3)科研小組從同一平板中挑選出A、B、C三種菌落進(jìn)行梯度稀釋并分別涂布接種在分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基上,經(jīng)適宜培養(yǎng)后,均能檢測(cè)到A、B菌落卻始終檢測(cè)不到C種菌落。 ①由此可得出的結(jié)論是　　　　　　　　　　　　　　　　。 ②推測(cè)C種細(xì)菌與A、B等在同一個(gè)平板上能生長(zhǎng)繁殖的可能原因是　。 14.(13分)(2018山東省實(shí)驗(yàn)中學(xué)一模)某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn),同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過(guò)程如圖所示,請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 (1)抗鹽基因是否在煙草細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選用　　　　　　和　　　　　　兩種酶對(duì)目的基因和質(zhì)粒進(jìn)行切割,以保證重組DNA序列的唯一性。 (3)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。含有目的基因的農(nóng)桿菌可根據(jù)標(biāo)記基因進(jìn)行篩選。若農(nóng)桿菌在含有氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上都可以生長(zhǎng)繁殖,農(nóng)桿菌中是否已含有目的基因?　　　(填“是”或“否”)。為什么?　　　　　　　　　　　。 (4)愈傷組織經(jīng)　　　　　　形成完整植株,這一過(guò)程需要再轉(zhuǎn)接到　　　　　　培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),該過(guò)程的實(shí)質(zhì)是　　　　　　　　　　　　。 15.(14分)(2018河南安陽(yáng)三模)中國(guó)科學(xué)家成功突破了克隆猴這個(gè)世界生物學(xué)前沿的難題,率先建立起可有效模擬人類(lèi)疾病的動(dòng)物模型,實(shí)現(xiàn)了我國(guó)在非人靈長(zhǎng)類(lèi)研究領(lǐng)域由國(guó)際“并跑”到“領(lǐng)跑”的轉(zhuǎn)變。據(jù)此回答下列問(wèn)題。 (1)克隆猴的誕生,體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的　　　　　具有全能性。相對(duì)于植物組織培養(yǎng)而言,動(dòng)物尤其是高等動(dòng)物的克隆比較困難的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　。克隆過(guò)程中一般利用未受精的去核卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞,原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 (2)克隆猴培養(yǎng)過(guò)程中需要用　　　　　　　　酶處理使細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)。為了提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率,可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加　　　　　　　　等天然成分,以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)。培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度,CO2的作用是　　　　　　　　　　　。克隆猴除了用到動(dòng)物細(xì)胞工程的相關(guān)生物技術(shù)手段外,還必須用到　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出兩種技術(shù))。  單元質(zhì)檢卷十　生物技術(shù)與工程 1.D　常用固體或半固體培養(yǎng)基分離獲得細(xì)菌單菌落,液體培養(yǎng)基無(wú)法分離,A項(xiàng)錯(cuò)誤;若培養(yǎng)基需要調(diào)節(jié)pH,應(yīng)該在滅菌前進(jìn)行,B項(xiàng)錯(cuò)誤;顯微鏡直接計(jì)數(shù)法是測(cè)定培養(yǎng)液中微生物數(shù)量的方法,固體培養(yǎng)基上用稀釋涂布法直接計(jì)數(shù)單個(gè)菌落數(shù),C項(xiàng)錯(cuò)誤;平板倒置是避免冷凝的液體滴落到培養(yǎng)基上,污染培養(yǎng)基,D項(xiàng)正確。 2.D　由題圖可知,①是倒平板,②是用接種環(huán)蘸取菌液,③是進(jìn)行平板劃線,④是培養(yǎng)結(jié)果。①步驟表示倒平板,在倒平板之前培養(yǎng)基已經(jīng)滅菌并調(diào)節(jié)過(guò)pH,A項(xiàng)正確;①②③步驟操作時(shí)需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行,防止被雜菌污染,B項(xiàng)正確;將④放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)時(shí),需要將平板倒置,防止皿蓋上的冷凝水滴落污染培養(yǎng)基,C項(xiàng)正確;接種環(huán)在每次接種前和接種結(jié)束后都要通過(guò)灼燒來(lái)滅菌,所以完成步驟中5次劃線操作前都要灼燒滅菌,接種結(jié)束后還需灼燒滅菌1次,防止造成污染,由此可見(jiàn),完成步驟④共需灼燒接種環(huán)6次,D項(xiàng)錯(cuò)誤。 3.A　乳酸菌是原核生物,細(xì)胞內(nèi)沒(méi)有核膜包圍的細(xì)胞核,A項(xiàng)錯(cuò)誤;根據(jù)曲線圖中乳酸菌和酵母菌的數(shù)量變化曲線對(duì)比分析可知,發(fā)酵初期乳酸菌遠(yuǎn)多于酵母菌,所以乳酸菌為明顯的優(yōu)勢(shì)菌種,B項(xiàng)正確;結(jié)合曲線圖分析,前6天,由于乳酸菌遠(yuǎn)多于酵母菌,其產(chǎn)生的乳酸會(huì)降低pH,C項(xiàng)正確;由于整個(gè)發(fā)酵過(guò)程都是在無(wú)氧環(huán)境條件下進(jìn)行的,在發(fā)酵中期,酵母菌明顯增多,酵母菌增多只能利用無(wú)氧呼吸釋放的能量增殖,D項(xiàng)正確。 4.B　基因探針的本質(zhì)是DNA分子,不是檢測(cè)疾病的醫(yī)療器械,A項(xiàng)錯(cuò)誤;在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素或熒光分子等作標(biāo)記可以作為探針,B項(xiàng)正確;基因探針是被標(biāo)記的單鏈DNA,不是蛋白質(zhì),C項(xiàng)錯(cuò)誤;基因探針是被標(biāo)記的單鏈DNA,不是人工合成的免疫球蛋白,D項(xiàng)錯(cuò)誤。 5.C　基因工程是通過(guò)轉(zhuǎn)基因來(lái)實(shí)現(xiàn)的,原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì),而蛋白質(zhì)工程是依據(jù)蛋白質(zhì)的功能對(duì)基因進(jìn)行改造,然后利用改造以后的基因產(chǎn)生一種新的蛋白質(zhì),A項(xiàng)正確;蛋白質(zhì)工程是依據(jù)功能推測(cè)氨基酸序列,再推測(cè)出有關(guān)的基因,所以蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的,蛋白質(zhì)工程最終還是要通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成,B項(xiàng)正確;基因在條件適宜的時(shí)候可以自我復(fù)制,但是蛋白質(zhì)不能自我復(fù)制,C項(xiàng)錯(cuò)誤;基因工程的原理是基因重組,遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變,屬于可遺傳變異,蛋白質(zhì)工程改造的也是有關(guān)的基因,也可以遺傳,所以基因工程和蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異都是可遺傳的,D項(xiàng)正確。 6.A?、轂檗D(zhuǎn)基因植株,只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀就說(shuō)明轉(zhuǎn)入的目的基因成功表達(dá)了,而轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組,屬于可遺傳變異,A項(xiàng)正確;③侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到棉花細(xì)胞的染色體上,B項(xiàng)錯(cuò)誤;細(xì)胞中的基因是選擇性表達(dá)的,即使④的染色體上含抗蟲(chóng)基因,⑤也不一定能夠表達(dá)出抗蟲(chóng)性狀,C項(xiàng)錯(cuò)誤;②重組質(zhì)粒的構(gòu)建需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶的參與,而DNA聚合酶一般用于DNA復(fù)制過(guò)程,D項(xiàng)錯(cuò)誤。 7.B　電刺激可誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合或動(dòng)物細(xì)胞融合,A項(xiàng)正確;某種植物甲、乙兩品種體細(xì)胞雜交后代的染色體數(shù)是甲、乙兩品種雜交后代的染色體數(shù)的兩倍,B項(xiàng)錯(cuò)誤;小鼠骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)抗原免疫小鼠的B淋巴細(xì)胞融合可制備單克隆抗體,C項(xiàng)正確;去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁和將動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞均需酶處理,D項(xiàng)正確。 8.D　植物體細(xì)胞雜交可以克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,不用考慮兩種高等植物間的生殖隔離問(wèn)題,A項(xiàng)正確;誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合可采用促融劑聚乙二醇處理,也可以采用離心、振動(dòng)等物理方法,B項(xiàng)正確;雜種細(xì)胞應(yīng)具有紅色液泡和綠色的葉綠體,可利用光學(xué)顯微鏡觀察、篩選出雜種原生質(zhì)體,C項(xiàng)正確;若原生質(zhì)體均為兩兩融合,可能是同種細(xì)胞融合,也可能是不同細(xì)胞融合,融合后的細(xì)胞中染色體數(shù)目可能為28,96或62條,D項(xiàng)錯(cuò)誤。 9.A　用以治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”就是以單克隆抗體的定位導(dǎo)向作用將抗癌藥物定向帶到癌細(xì)胞,在原位殺死癌細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤;①過(guò)程的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理基本相同,都是依靠細(xì)胞膜的流動(dòng)性,B項(xiàng)正確;②過(guò)程需要篩選出既能無(wú)限增殖又能分泌特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞并克隆單個(gè)雜交瘤細(xì)胞,C項(xiàng)正確,過(guò)程③中由于抗體具有高度特異性使其跟蹤作用非常準(zhǔn)確,D項(xiàng)正確。 10.A　卵子的發(fā)生開(kāi)始于胚胎性別分化之后,并且MⅠ和MⅡ兩次分裂是不連續(xù)的,A項(xiàng)錯(cuò)誤;雄原核形成與卵子完成減數(shù)第二次分裂是同時(shí)進(jìn)行的,B項(xiàng)正確;精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間,發(fā)生透明帶反應(yīng),阻止其他精子進(jìn)入,是防止多精入卵受精的第一道屏障,C項(xiàng)正確;獲能的精子能夠刺激卵細(xì)胞膜發(fā)生變化,阻止其他精子進(jìn)入卵內(nèi),是防止多精入卵受精的第二道屏障,D項(xiàng)正確。 11.D　來(lái)自同一個(gè)胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì),因此不需要將囊胚進(jìn)行多等分,而應(yīng)分離少量滋養(yǎng)層細(xì)胞,培養(yǎng)后檢測(cè)基因型,從中篩選所需胚胎進(jìn)行移植,A項(xiàng)錯(cuò)誤;需要從囊胚中分離少量滋養(yǎng)層細(xì)胞,培養(yǎng)后檢測(cè)基因型,B項(xiàng)錯(cuò)誤;應(yīng)從囊胚中分離少量滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),因?yàn)檠蛩屑?xì)胞可能不是胚胎脫落的細(xì)胞,篩選出基因型為hh的個(gè)體進(jìn)行移植,C項(xiàng)錯(cuò)誤;培育試管嬰兒時(shí),需先進(jìn)行超數(shù)排卵處理,再進(jìn)行體外受精,D項(xiàng)正確。 12.A　植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的原理不完全相同,植物體細(xì)胞雜交的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞的全能性,而動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性和細(xì)胞增殖,A項(xiàng)錯(cuò)誤。從理論上講,基因工程和細(xì)胞工程都可以定向改造生物的遺傳性狀和克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙,B項(xiàng)正確?；蚬こ痰墓ぞ呙赣邢拗泼浮NA連接酶等,限制性核酸內(nèi)切酶可以識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列,并在每條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵進(jìn)行切割的一類(lèi)酶,DNA連接酶用于構(gòu)建基因表達(dá)載體;細(xì)胞工程的工具酶有纖維素酶、胰蛋白酶等,纖維素酶用于去除植物的細(xì)胞壁,胰蛋白酶可使動(dòng)物組織分散成單個(gè)細(xì)胞,C項(xiàng)正確。通過(guò)基因工程和發(fā)酵工程可以生產(chǎn)出乙肝疫苗、胰島素、某些種類(lèi)的單克隆抗體,D項(xiàng)正確。 13.答案(1)控制脲酶合成的基因　尿素　異養(yǎng) (2)稀釋度過(guò)高(或涂布器灼燒后沒(méi)冷卻)　該土樣中有多種細(xì)菌能分解尿素 (3)①C種菌落的細(xì)菌不能分解尿素 ②C種菌落的細(xì)菌可從A或B菌落的代謝產(chǎn)物中獲得氮源 解析(1)分解尿素的細(xì)菌之所以能分解尿素的根本原因是具有控制合成脲酶的基因。為篩選出分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)選擇尿素作為唯一氮源,即能分解利用尿素的細(xì)菌能正常生長(zhǎng)繁殖,不能利用尿素的細(xì)菌被淘汰。分解尿素的細(xì)菌不能用CO2作為碳源,但可用葡萄糖作為碳源,由此得出分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型生物。(2)利用稀釋涂布平板法進(jìn)行接種培養(yǎng)后,若有3個(gè)平板均沒(méi)出現(xiàn)菌落,可能的原因是稀釋度過(guò)高,導(dǎo)致涂布的菌液中不含分解尿素的細(xì)菌,或涂布器灼燒后沒(méi)冷卻,導(dǎo)致接種液中尿素分解菌被殺死。若在某個(gè)稀釋度下涂布接種的3個(gè)平板經(jīng)適宜培養(yǎng)后均存在多種不同特征的菌落,說(shuō)明接種用的土樣中存在多種尿素分解菌,而不同分解菌形成的菌落特征不同。(3)結(jié)合題意分析,A、B、C三種菌落能混合生長(zhǎng)在篩選尿素分解菌的選擇培養(yǎng)基中,但C菌落卻不能單獨(dú)生長(zhǎng)在這樣的選擇培養(yǎng)基中,說(shuō)明利用A、B菌落分解利用尿素,但C菌落不能單獨(dú)分解利用尿素,很可能就是C種菌落的細(xì)菌可從A或B菌落的代謝產(chǎn)物中獲得氮源。 14.答案(1)抗鹽基因(目的基因)是否插入到煙草的染色體DNA上 (2)HindⅢ　SalⅠ (3)否　含有目的基因的質(zhì)?？顾沫h(huán)素的基因被破壞 (4)再分化　分化　基因的選擇性表達(dá) 解析(1)抗鹽基因是否在煙草細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是抗鹽基因(目的基因)是否插入到煙草的染色體DNA上。(2)只用SalⅠ酶切割含有目的基因的DNA與質(zhì)粒,形成相同的黏性末端,容易發(fā)生自身連接和反向接入,BamHⅠ會(huì)破壞目的基因,則在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),應(yīng)選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對(duì)質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割,以保證重組DNA序列的唯一性。(3)選用SalⅠ、HindⅢ兩種酶對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行切割時(shí),形成的重組質(zhì)粒中含抗氨芐青霉基因而抗四環(huán)素基因被破壞,故農(nóng)桿菌中不含有目的基因。(4)愈傷組織經(jīng)再分化,形成完整植株,這一過(guò)程需要再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng),細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是選擇性表達(dá)。 15.答案(1)細(xì)胞核　細(xì)胞難以脫分化,體細(xì)胞核內(nèi)雖然有全套基因,但大部分基因在分化后就不再表達(dá),很難被激活　卵細(xì)胞體積大,易操作,營(yíng)養(yǎng)豐富,未受精的卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有激活體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性的物質(zhì)(或未受精的卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)易激發(fā)體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性表達(dá)) (2)胰蛋白(或膠原蛋白)　動(dòng)物血清 維持培養(yǎng)液的pH　早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù) 解析(1)克隆猴的誕生,體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。由于動(dòng)物細(xì)胞難以脫分化,體細(xì)胞核內(nèi)雖然有全套基因,但大部分基因在分化后就不再表達(dá),很難被激活,因此相對(duì)于植物組織培養(yǎng)而言,動(dòng)物尤其是高等動(dòng)物的克隆比較困難?？寺∵^(guò)程(核移植)中一般利用未受精的去核卵細(xì)胞作為受體細(xì)胞,原因是卵細(xì)胞體積大,易操作,營(yíng)養(yǎng)豐富,未受精的卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有激活體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性的物質(zhì)(或未受精的卵細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)易激發(fā)體細(xì)胞的細(xì)胞核全能性表達(dá))。(2)克隆猴培養(yǎng)過(guò)程(動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng))中需要用胰蛋白(或膠原蛋白)酶處理使細(xì)胞從瓶壁上分離下來(lái)。為了提高動(dòng)物細(xì)胞克隆形成率,可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加動(dòng)物血清等天然成分,以滋養(yǎng)細(xì)胞支持生長(zhǎng)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中添加CO2的作用是維持培養(yǎng)液的pH?？寺『?核移植)除了用到動(dòng)物細(xì)胞工程的相關(guān)生物技術(shù)手段外,還必須用到胚胎工程中的早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)。