《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研設(shè)計(jì)》由會員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研設(shè)計(jì)（48頁珍藏版）》請?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

科學(xué)研究的第一步 提出假說 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研設(shè)計(jì) 假說是根據(jù)一定的科學(xué)事實(shí)和科學(xué)理論 對擬研究的問題提出的假定性說明或試探性解釋科學(xué)研究就是提出假說 實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)假說 修正和發(fā)展假說的過程 一 假說的作用為形成新理論提供毛胚為實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)提供方向?yàn)榭蒲邪l(fā)展提供焦點(diǎn) 二 假說的特性1 來源的科學(xué)性和客觀性 胃腸道神經(jīng)支配的第三成分假說的提出 2 說明的假定性 3 預(yù)見的可驗(yàn)性可以被檢驗(yàn) 4 發(fā)展的螺旋性假設(shè) 檢驗(yàn) 再假設(shè) 再檢驗(yàn) 澳大利亞某地羊發(fā)生貧血水草豐富 假定缺鐵 粗制鐵劑可預(yù)防 假設(shè)成立 純鐵劑無效 第2假設(shè) 療效來自鐵的雜質(zhì) 各種微量元素 鈷有效 第2假設(shè)成立 口服鈷有效 注射無效 第3假設(shè) 腸道微生物利用鈷合成抗貧血物質(zhì) 比較不同微生物利用鈷 發(fā)現(xiàn)大腸桿菌可利用鈷合成B12 再抗貧血 三 假說形成的方法 假說的提出需要創(chuàng)新性思維 假說形成的基礎(chǔ)假說建立在客觀事實(shí)的基礎(chǔ)上假說是科學(xué)的想象和推理假說應(yīng)能解釋已有現(xiàn)象假說需突破傳統(tǒng)思維 假說形成的方法 1 比較分類比較對象間的異同 并進(jìn)行分類 受體分類 血型的發(fā)現(xiàn) 2 歸納推理 由特殊到一般 1 求同法根據(jù)事物發(fā)生的一致性 2 求異法根據(jù)事物間的差異 RobertF Furchgott EDRF的發(fā)現(xiàn)1998年獲諾貝爾獎 3 剩余法 3 演繹推理 由一般到特殊 由已知規(guī)律推論未知事物 根據(jù)DNA堿基序列推出蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)從蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)預(yù)測蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)從蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)預(yù)測它的細(xì)胞定位和功能 根據(jù)兩個(gè)或兩類對象有部分屬性相同 從而推出它們的其他屬性也相同 4 類比推理 從特殊推向特殊 EDRF與NO生物學(xué)作用的相似性半衰期短被Hb和超氧陰離子滅活舒張血管作用伴隨cGMP的增高 推測 EDRF本質(zhì)可能是NO 解釋性原則 有事實(shí)依據(jù) 解釋已有事實(shí)能解釋舊理論能解釋的事實(shí)能解釋舊理論不能解釋的事實(shí)相容性原則不應(yīng)與已有的基本理論相矛盾如休克的微循環(huán)學(xué)說休克的細(xì)胞因子學(xué)說簡單性原則可檢驗(yàn)性原則 建立假說的原則 假說上升為理論的條件 能解釋舊理論能解釋的事實(shí)能解釋舊理論不能解釋的事實(shí)能夠正確預(yù)見尚未觀察到的自然現(xiàn)象 證實(shí)與證偽 天下烏鴉一般黑證實(shí) 觀察每一只都是黑的后才成立證偽 只要發(fā)現(xiàn)一只不是的就不成立 破譯西塔潘猜想 醫(yī)學(xué)科研方法學(xué) 醫(yī)學(xué)科研的基本要素 中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)系 羅自強(qiáng) 內(nèi)皮素 1對肺 型細(xì)胞表面活性物質(zhì)合成的調(diào)控 被試因素實(shí)驗(yàn)對象實(shí)驗(yàn)效應(yīng) 一 被試因素 1 因素 factor 與水平 level 雌二醇對肺成纖維細(xì)胞增殖的調(diào)控 不同季節(jié)環(huán)磷酰胺對小鼠精子細(xì)胞致畸效應(yīng)的研究 性別與年齡和心肌梗塞病死率的研究 心理應(yīng)激與高血壓發(fā)生的關(guān)系 CC16genepolymorphisminfluencesthedegreeofairwayresponsivenessinasthmaticchildren 外源性的 人為給予的物理 化學(xué) 生物因素外界客觀存在的 氣候 季節(jié)等內(nèi)源性的的自身特征 性別 年齡 心理 遺傳因素 因素 實(shí)驗(yàn)的目的是闡明被試因素的作用 被試因素 T 非被試因素 N t n 實(shí)驗(yàn)組 T N t n對照組 N n 必須明確被試因素 各組間非被試因素必須一致 效應(yīng)T t 水平的選定水平 實(shí)驗(yàn)因素的不同的量或狀態(tài) 被試因素的效應(yīng)與水平有依賴關(guān)系藥物如果沒有量 效關(guān)系 為非特異作用水平的選擇與目的有關(guān) 藥效篩選 最大安全量 通常LD50的1 10 影響藥效的因素 半數(shù)有效濃度 EC50 半數(shù)有效劑量 ED50 毒性實(shí)驗(yàn) 半數(shù)致死量 LD50 最大致死量 LD100 單因素單水平 簡單易行 效率不高單因素多水平 比較不同劑量多因素單水平 比較不同因素 藥物 療法 多因素多水平 探索聯(lián)合用藥方案 最佳反應(yīng)條件 因素與水平的組合 2 因素的施加 確保因素的施加被試因素標(biāo)準(zhǔn)化 保證被試因素在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中始終保持一致劑量 劑型 給藥時(shí)間 用藥時(shí)間 給藥途徑 藥品批號 季節(jié)節(jié)律 苯丙胺LD501月小于7月 實(shí)驗(yàn)組和對照組平行進(jìn)行 給藥途徑 吸收速度靜脈注射 吸入 肌肉 腹腔 皮下 口服 經(jīng)肛 貼皮 藥物的生物轉(zhuǎn)化口服 先經(jīng)肝轉(zhuǎn)化皮下 肌肉 靜脈 先經(jīng)肺轉(zhuǎn)化 正確選擇劑量 口服100 灌胃100 灌腸100 200 皮下30 50 肌肉25 30 腹腔25 30 靜脈20 25 二 受試對象 實(shí)驗(yàn)對象的確定取決于試驗(yàn)?zāi)康? 受試對象的選擇 1 敏感 穩(wěn)定動脈粥樣硬化兔過敏反應(yīng)豚鼠心肌缺血狗 兔 大鼠 豬降壓治療高血壓II期 2 可行性 3 病人診斷明確 客觀指標(biāo) 實(shí)驗(yàn)動物種屬 品系 窩別 性別 齡 體重 營養(yǎng)狀態(tài)和飼養(yǎng)條件 實(shí)驗(yàn)動物分為四級 一級 普通動物 conventinalanimal 教學(xué)和預(yù)試二級 清潔動物 cleananimal 大多數(shù)的科研三級 無特定病原體動物 specificpathogenfreeanimal 為國際標(biāo)準(zhǔn)級 所有科研四級 無菌動物 germfreeanimal 特殊課題 實(shí)驗(yàn)動物管理?xiàng)l例 國家科委 1988 第四章實(shí)驗(yàn)動物的應(yīng)用第十九條應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動物應(yīng)當(dāng)根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?選用相應(yīng)的合格實(shí)驗(yàn)動物 申報(bào)科研課題和鑒定科研成果 應(yīng)當(dāng)把應(yīng)用合格實(shí)驗(yàn)動物作為基本條件 應(yīng)用不合格實(shí)驗(yàn)動物取得的檢定或者安全評價(jià)結(jié)果無效 所生產(chǎn)的制品不得使用 第二十條供應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)動物應(yīng)當(dāng)具備下列完整的資料 一 品種 品系及亞系的確切名稱 二 遺傳背景或其來源 三 微生物檢測狀況 四 合格證書 五 飼育單位負(fù)責(zé)人簽名 實(shí)驗(yàn)動物管理?xiàng)l例 國家科委 1988 下列情況一般不作為臨床研究對象 存在影響結(jié)果的并發(fā)癥 危重狀態(tài) 多種療法無效 不配合者 2 選擇適當(dāng)?shù)难芯克秸w實(shí)驗(yàn) invivo 綜合性實(shí)驗(yàn)離體實(shí)驗(yàn) invitro 分析性實(shí)驗(yàn)器官水平細(xì)胞水平分子水平半體內(nèi)實(shí)驗(yàn) exvivo 分析性實(shí)驗(yàn) 3 受試對象的純化所用受試對象力求一致 盡力減少個(gè)體差異 降低非被試因素對效應(yīng)的影響 1 表現(xiàn)典型的確診病例 2 病情輕重一致 先從病情中等的病例開始 3 使用統(tǒng)一 公認(rèn)的診斷和分型分級標(biāo)準(zhǔn) 實(shí)驗(yàn)動物種屬 品系 窩別 性別 齡 體重 營養(yǎng)狀態(tài)和飼養(yǎng)條件 人體為研究對象種族 性別 年齡 體重 職業(yè) 工種 工齡 精神狀態(tài) 居住條件 生活習(xí)慣 嗜好 經(jīng)濟(jì)及社會因素 病人為研究對象病種 病程 病期 病型 既往史 治療和護(hù)理?xiàng)l件 Case某人為了研究 補(bǔ)充維生素A對學(xué)齡前兒童血紅蛋白的影響 選擇1999年秋季入托的三歲兒童進(jìn)行體檢 排除呼吸道 消化道等系統(tǒng)疾病 測定174名兒童的血清VA 血紅蛋白 血清鐵濃度 將血紅蛋白 110g L定為貧血 再將貧血組兒童隨機(jī)分為兩組 一組為治療組33例 每日投VA2000IU 另一組為對照組25例 三月后 兩組兒童分別查血清VA 血紅蛋白 血清鐵濃度 結(jié)果 治療組三月后血清VA 血紅蛋白 血清鐵濃度明顯升高P 0 01 對照組治療后無明顯變化P 0 05 4 受試對象的依從性按預(yù)定計(jì)劃接受被試因素的合作程度 增加患者的信任感 實(shí)驗(yàn)時(shí)間不要太長 盲法 單盲 雙盲 三盲 三 試驗(yàn)效應(yīng) 客觀指標(biāo)主觀指標(biāo)定量指標(biāo)定性指標(biāo)率定量和定性指標(biāo)的轉(zhuǎn)換特異性指標(biāo)非特異性指標(biāo)如肌酸激酶 CK CK BB 主要在腦 CK MB 主要在心 CK MM 主要在骨骼肌和心肌 比較生物效應(yīng)可以用引起同一水平效應(yīng)所需要的量半數(shù)致死量LD50半數(shù)有效量ED50半數(shù)有效濃度EC50閾強(qiáng)度 比較生物效應(yīng)的時(shí)間潛伏期半衰期效應(yīng)持續(xù)期 從起效到作用消失所需時(shí)間 三 試驗(yàn)效應(yīng) 一 指標(biāo)的要求扣題 關(guān)聯(lián)性TXA2TXB211 脫氫TXB2PGI26 酮 PGFI 去二甲6 酮 PGFI 自由基膜磷脂MDA血小板AA代謝 自由基膜磷脂 異構(gòu)前列腺素 isoprostane 結(jié)果兩名醫(yī)生讀名醫(yī)生在兩次同一批片子不同時(shí)間讀片 結(jié)果一致6245701結(jié)果不一致2686 30 192 21 X線胸片讀片結(jié)果 2 客觀化 三 試驗(yàn)效應(yīng) 一 指標(biāo)的要求1 扣題 關(guān)聯(lián)性指標(biāo)與研究主題要有本質(zhì)聯(lián)系2 客觀化 統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn) 儀器相對定量 多人盲法 加權(quán)平均 3 靈敏度 能正確反映效應(yīng)變化的最小數(shù)量或水平 4 指標(biāo)的可用性 敏感度 是否可檢出發(fā)生的變化 真陽性率特異度 檢出變化的專一性 真陰性率 真陽性率 a a c 真陰性率 d b d 漏診率 1 真陽性率 誤診率 1 真陰性率 5 指標(biāo)的精確性 準(zhǔn)確度 與真實(shí)值的接近程度 測定的正確性主要取決于系統(tǒng)誤差血糖正常值 100 120mg 100ml 化學(xué)法 80 100mg 100ml 酶法 精密度 各次測定值的集中程度 測定的可重復(fù)性主要取決于隨機(jī)誤差 二 注意事項(xiàng) 1 標(biāo)本的采集于儲存標(biāo)準(zhǔn)化采樣時(shí)間 部位 方法 保持 運(yùn)輸2 測定方法標(biāo)準(zhǔn)化方法 儀器 試劑 條件 人員 3 依據(jù)專業(yè)知識選指標(biāo) 藥物顯效好轉(zhuǎn)無效惡化死亡合計(jì)有效率死亡率A55800158823856 7 37 0 B1323018517 1 33 3 A B兩藥治療肝癌的近期效果 4 多指標(biāo) 5 盡量選高 精 尖 新指標(biāo)6 重視實(shí)驗(yàn)方法的可靠性7 減少其他因素對指標(biāo)的干擾