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第五節(jié) 抑制或殺滅微生物的理化因素,1,消毒滅菌的常用術(shù)語(yǔ),滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法。包括細(xì)菌芽胞、病毒和霉菌在內(nèi)的全部病原微生物和非病原微生物。 消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物、并不一定能殺死細(xì)菌芽胞或非病原微生物的方法。,2,防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的方法。 清潔（cleaning）：是指通過(guò)除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過(guò)程。 無(wú)菌（asepsis）和無(wú)菌操作：無(wú)菌是無(wú)活菌的意思，多是滅菌的結(jié)果。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其它物品的操作技術(shù)，稱為無(wú)菌操作。,3,消毒滅菌的方法,物理消毒滅菌法 化學(xué)消毒滅菌法,4,一、物理消毒滅菌法 （一）熱力滅菌法 1.干熱滅菌法 殺菌機(jī)制：使菌體脫水干燥、大分子變性。 殺菌條件：80~100℃ 1h可殺死繁殖體，160~170 ℃ 2h 可殺死芽胞。,5,常用方法,焚燒----最徹底的滅菌方法 燒灼----直接用火焰滅菌方法 干烤----加熱160-170℃ 2h,6,2. 濕熱滅菌法,殺菌機(jī)制：在水分子存在情況下更易于使菌體蛋白凝固，熱力穿透性更強(qiáng)。,常用方法,巴氏消毒法,煮沸消毒法,流通蒸汽消毒法,間歇蒸汽滅菌法,高壓蒸汽滅菌法,7,巴氏消毒法,概念 方法 用途,8,煮沸消毒法,原理 滅菌條件 應(yīng)用范圍,9,流通蒸汽消毒法,原理 消毒條件 常用的器具,10,間歇蒸汽滅菌法,原理 方法 用途,11,高壓蒸汽滅菌法,原理 滅菌條件 應(yīng)用范圍 注意,12,高壓蒸汽滅菌鍋,13,（二）輻射殺菌法 1.紫外線,殺菌波長(zhǎng) ：波長(zhǎng)240～300nm的紫外線具有殺菌作用265～266nm殺菌能力最強(qiáng)。,殺菌機(jī)制：使胸腺嘧啶形成二聚體，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。 特點(diǎn)：穿透力弱。 用途：空氣、物品表面消毒。 注意：紫外線對(duì)眼睛、皮膚有損傷作用,14,特點(diǎn)：穿透力強(qiáng)，不破壞營(yíng)養(yǎng)。 適用：塑料、食品、藥品和生物制品消毒滅菌。 3.微波 使物品發(fā)熱。,2.電離輻射,殺菌機(jī)理：,產(chǎn)生游離基，破壞DNA,15,（三）濾過(guò)除菌法,原理,用物理阻留的方法除去液體或空氣中的細(xì)菌、真菌,以達(dá)到除菌目的。,濾菌器,含有微細(xì)小孔0.1～ 0.45微米,只允許液體或氣體通過(guò),而大于孔徑的細(xì)菌等顆粒不能通過(guò) 。,用途,血清、毒素、抗生素以及藥液的除菌,,注意：病毒、支原體、某些L型細(xì)菌可以通過(guò)濾菌器,16,17,18,濾器和層流室,19,（四）干燥與低溫抑菌法 不耐干燥的微生物。 低溫一般不能殺死細(xì)菌。,冷凍真空干燥法：在低溫狀態(tài)下真空抽去水分,20,化學(xué)消毒滅菌法,消毒劑的種類 消毒劑的應(yīng)用,酚類、醇類、重金屬鹽類、氧化劑、表面活性劑,人體體表、醫(yī)療器械、 周圍環(huán)境,21,（一）殺菌機(jī)制 1.促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固 to denaturate and coagulate proteins of bacterial cell 酚類--石碳酸、來(lái)蘇、洗必泰等。 醇類--70%～75%乙醇?xì)⒕ψ顝?qiáng)。 重金屬鹽類--紅汞等。 烷化劑--甲醛等，殺菌力強(qiáng)，但毒性大，有致癌性。,22,2.干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝 to interfere enzymatic system and metabolism of bacterium,氧化劑---過(guò)氧化氫、高錳酸鉀 等，與細(xì)菌的酶結(jié)合使之失去活 性。過(guò)氧乙酸 對(duì)細(xì)菌繁殖體和芽胞、真菌、病毒都有殺滅作用。,23,3.損傷菌細(xì)胞膜 to damage cell membrance of bacterium,表面活性劑、脂溶劑：增加菌細(xì)胞表面張力，并增加其通透性使細(xì)菌破裂。 注意：大多對(duì)人體組織有害，只能外用或環(huán)境消毒。,24,（二）消毒劑的應(yīng)用,25,（三）化學(xué)消毒劑按其殺菌能力分三大類,1.高效消毒劑 （high-level disinfectants） ①含氯消毒劑（次氯酸鈉、二氯異氰酸尿酸鈉和漂白粉）②過(guò)氧化物消毒劑（過(guò)氧化氫、過(guò)氧乙酸） ③醛類消毒劑 （戊二醛、甲醛） ④環(huán)氧乙烷 2.中效消毒劑 （intermediate-level disinfectants） ①含碘消毒劑（碘酊、碘伏） ②醇類消毒劑（乙醇、異丙醇） 3.低效消毒劑 （low-level disinfectants） ①季銨鹽類 （苯扎溴銨） ②氯已定 ③高錳酸鉀,26,固體二氧化氯消毒劑,27,消毒滅菌的運(yùn)用,1.高危器械物品 用時(shí)需進(jìn)入無(wú)菌組織的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌。如針頭、注射器、手術(shù)器械、注射液體、敷料、靜脈導(dǎo)管和尿道插管等。 2.中危器械物品 用時(shí)不進(jìn)入無(wú)菌組織，但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。如呼吸機(jī)、麻醉機(jī)、胃鏡、支氣管鏡、陰道窺器、體溫計(jì)和口腔器械等等。,（一）醫(yī)療器械物品的消毒滅菌,28,3.低危器械物品 只接觸未損傷皮膚,但不進(jìn)入無(wú)菌組織和不接觸黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。如治療盤、治療車、食品器皿、便盆等。 4.快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械 醫(yī)療工作中需要快速周轉(zhuǎn)的關(guān)鍵和半關(guān)鍵器材。如纖維內(nèi)窺鏡、牙鉆、牙科手術(shù)器械等。,29,（二）室內(nèi)空氣消毒滅菌 1.物理消毒法 ①紫外線照射（1.5W/m3，1h）最常用；②濾過(guò)除菌：空氣通過(guò)孔徑小于0.2μm的高效過(guò)濾裝置以除去細(xì)菌和帶菌塵埃。 2．化學(xué)消毒法 包括化學(xué)消毒劑噴霧和熏蒸①過(guò)氧乙酸噴霧、熏蒸；②過(guò)氧化氫噴霧；③二氧化氯溶液噴灑；④中草藥點(diǎn)燃煙熏。 （三）手和皮膚的消毒 人體手上的細(xì)菌可分為暫住菌和常住菌兩大類。用肥皂和流動(dòng)水經(jīng)常并正確洗手 病原微生物污染時(shí)應(yīng)用消毒劑消毒。常用的有75%酒精、0.2%過(guò)氧乙酸、0.4 %～0.5 %氯已定溶液等。,30,（四）黏膜的消毒 口腔黏膜3%過(guò)氧化氫、尿道、陰道、膀胱0.1%～0.5%氯已定。 （五）病人排泄物與分泌物的消毒滅菌 50g∕L次氯酸鈉、漂白粉等。 （六）病人污染物品的消毒 日常生活用具：煮沸、 0.5%過(guò)氧乙酸浸泡。 家具： 0.2 %～0.5 %過(guò)氧乙酸。 （七）飲水的消毒 自來(lái)水：氯氣、漂白粉。 （八）環(huán)境的消毒,31,影響消毒滅菌效果的因素,一、微生物的種類 二、微生物的物理狀態(tài) 三、微生物的數(shù)量 四、消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間 五、溫度 六、酸堿度 七、有機(jī)物,32,病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全,生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safety of biotechnology）的簡(jiǎn)稱。 狹義地指現(xiàn)代生物技術(shù)的研究、開發(fā)、應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人類健康產(chǎn)生潛在的危害。 廣義地指與生物有關(guān)的各種因素對(duì)社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、人類健康及生態(tài)環(huán)境所產(chǎn)生的危害或潛在風(fēng)險(xiǎn)。,33,病原微生物所致的安全問(wèn)題，如病原微生物實(shí)驗(yàn)室的安全隱患、生物武器、生物恐怖、重大傳染病的暴發(fā)流行等，也是人類社會(huì)所面臨的最現(xiàn)實(shí)的生物安全問(wèn)題。 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全的核心是防擴(kuò)散和防感染。 關(guān)于病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全，我國(guó)法令包括對(duì)病原微生物的分類管理，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的分級(jí)管理，實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任等。,34,一、病原微生物的分類,根據(jù)傳染性、感染后對(duì)個(gè)體或者群體的危害程度，病原微生物分為四類： 第一類是指能夠引起人類或者動(dòng)物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國(guó)尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。 第二類是指能夠引起人類或者動(dòng)物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動(dòng)物與人、動(dòng)物與動(dòng)物間傳播的微生物。,35,一、病原微生物的分類,第三類是指能夠引起人或動(dòng)物疾病，但一般情況下對(duì)人、動(dòng)物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險(xiǎn)有限，實(shí)驗(yàn)室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。 第四類是指在通常情況下不會(huì)引起人或動(dòng)物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。 第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。,36,二、病原微生物實(shí)驗(yàn)室的分級(jí),37,一、二級(jí)實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。三級(jí)、四級(jí)實(shí)驗(yàn)室從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。 從事高致病性病原微生物相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)應(yīng)當(dāng)有２名以上的工作人員共同進(jìn)行。在同一個(gè)實(shí)驗(yàn)室的同一個(gè)獨(dú)立安全區(qū)域內(nèi)，只能同時(shí)從事一種高致病性病原微生物的相關(guān)實(shí)驗(yàn)活動(dòng)。應(yīng)有健全安全保衛(wèi)制度 。,38,實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護(hù)知識(shí)和實(shí)際操作技能。應(yīng)有符合要求的防護(hù)用品，應(yīng)建立健康檔案；進(jìn)行預(yù)防接種。 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有科學(xué)、嚴(yán)格的管理制度，定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室設(shè)施設(shè)備、材料等進(jìn)行檢查、維護(hù)和更新，應(yīng)對(duì)廢水、廢氣以及其他廢物進(jìn)行合理處置，防止環(huán)境污染。,39,生物安全,,40,三、實(shí)驗(yàn)室感染的控制以及監(jiān)督和法律責(zé)任,實(shí)驗(yàn)室感染控制工作包括定期檢查實(shí)驗(yàn)室的生物安全防護(hù)、病原微生物菌（毒）種和樣本保存與使用、安全操作、實(shí)驗(yàn)室排放的廢水和廢氣以及其他廢物處置等實(shí)施情況。 實(shí)驗(yàn)室發(fā)生高致病性病原微生物泄漏時(shí)，預(yù)防、控制措施包括：①封閉被病原微生物污染的實(shí)驗(yàn)室或可能造成病原微生物擴(kuò)散的場(chǎng)所；②開展流行病學(xué)調(diào)查；③對(duì)病人進(jìn)行隔離治療，對(duì)相關(guān)人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢查；④對(duì)密切接觸者進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察；⑤進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)消毒；⑥對(duì)染疫或者疑似染疫的動(dòng)物采取隔離、撲殺等措施。,41,監(jiān)督的主要內(nèi)容是監(jiān)督病原微生物實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行國(guó)家有關(guān)法律、行政法規(guī)、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和要求的記錄、檔案及報(bào)告的情況。 法律責(zé)任的核心是承擔(dān)造成傳染病傳播、流行或者其他嚴(yán)重后果的法律責(zé)任。,42,思考題,常用的消毒劑有哪些種類? 簡(jiǎn)述化學(xué)消毒劑的殺菌機(jī)制。 濕熱滅菌有哪些方法? 各有何用途? 筒述紫外線殺菌的作用機(jī)制和注意事項(xiàng)。 在溫度和時(shí)間相同的情況下，為什么濕熱滅菌法的效果比干熱法好? 當(dāng)從事病原生物學(xué)安全實(shí)驗(yàn)室工作時(shí)，應(yīng)考慮哪些與生物安全相關(guān)的問(wèn)題？,43,